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基因工程和分子生物学实验教程即将出书

已有 5979 次阅读 2009-2-13 18:13 |个人分类:未分类|系统分类:教学心得|关键词:学者| 基因工程, 分子生物学实验教材

本书是在三所大学有关教学和研究的老师们共同努力下完成的.

 下面是前言:

      

    分子生物学和基因工程实验技术的迅速发展,使生命科学在理论与应用上都取得了惊人的进展。在基因工程和分子生物学实验教学中,我们对实验材料、实验方法以及实验教学过程进行了大量的改革和研究,加强了基础技术的系统训练,从创新人才培养的角度增加了一系列综合性和设计性实验,引进一些现代的实验方法,如基因芯片技术及其应用,为学生开展创新研究提供了部分案例,在多年教学与科研的基础上,逐步形成了《基因工程与分子生物学实验教程》一书。该书具有丰富实验教学及科研经验的人员编写,内容精练,通俗易懂,学时安排灵活,可操作性强,适合高等学校本科实验教学使用。

本书在原理部分详细描述了相应实验技术的理论知识,使操作人员能理解操作过程,从而能灵活而准确地进行实验操作,有助于学生理解实验原理,并根据各实验室所具有的仪器设备、材料等因地制宜进行实验。

本书分三个部分,第一部分为基础实验,共十四个独立的实验技术,前十个实验在动物DNA、植物DNA和质粒DNA提取的基础上,进行酶切,将酶切后的基因组DNA与从琼脂糖凝胶中纯化后载体片段进行连接,同时PCR扩增目的片段,将目的片段从琼脂糖凝胶中纯化后与T载体进行连接。后面四个实验分别提供了从RNA水平和蛋白质水平检测基因表达的方法。基本包括了从基因组DNA和转录的RNA中克隆基因片段到连接转化构建到载体的基因工程和分子生物学最基本的实验技术。第二部分为综合实验,共七个综合实验,分别从不同的角度将不同的实验技术有机地整合,形成具有一定生物学意义的大实验,不仅训练了学生基础实验技术,也合理安排和节省了时间,同时提供了进行完整科学研究和应用操作的训练方法,可以根据使用者实验室的需要选择合适的研究性课题进行实验。第三部分是与基因芯片有关的二个创新性实验,不仅提供了前沿技术,还可以根据使用者实验室的需要结合科学研究进行创新性实验。

由于我们的水平有限,书中可能存在不妥之处,敬请读者批评指正。

 

编者

 

其中本实验教材中RNA提取的方法根据李青芳等人的CTAB法改进简化而成,节约了试剂盒的昂贵费用,减少了实验时间,适合本科生大实验使用。提取的RNA 是粗产品,RNA电泳也是常规电泳。

本书的一些关键实验后都有结果分析和注意事项部分,其中包括一些图片分析. 估计九月份印刷,有需要者请直接与武汉大学出版社联系.

教学效果:

用图片证明:

 

这张图是07年基因工程实验动物、植物、质粒DNA提取后酶切产物的电泳图

 





这张是上一年重组菌单克隆菌液PCR筛选重组子,这是学生进行分析的图。

 



今年其中一个班的同学的RNA提取的结果,交来的实验报告的图上每个人的结果,都做了标记,在反转录产物分析时分析的好的同学利用全班的结果进行了同小组的横向(茎芯、茎表皮、叶)和不同组相同模板和不同模板结果的表达差异分析。

 



这是今年同一个班的反转录产物图,产物分子量大小与预期的符合。

  2009年RNA提取结果和一点教学经验: http://www.sciencenet.cn/m/user_content.aspx?id=271112

 RNA提取方法修改:用1.5 ml离心管,提取液应加0.5ml,120微升醋酸钠应为1/5体积的提取液。原来体积是用于2ml离心管的。

 



https://m.sciencenet.cn/blog-44769-214858.html

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2 徐磊 唐小卿

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