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好的抗体+好的蛋白=不出结果没道理。

已有 5697 次阅读 2012-3-12 15:36 |个人分类:实验历程|系统分类:科研笔记|关键词:学者| 抗体

    由于忙于经营自己的实验也很少来科学网逛了,今天做完实验喘口气上来逛逛。

    western blotting(WB)可以说是实验中用的最多的技术,因此关于WB的操作和经验的文章也是一搜一箩筐,本人算上这次实验总共也不过做了几次完整的WB,而这次做的也是一种全新的蛋白,但是本人却一次拿到结果,虽然结果没有说一丁点杂带和背景也没有,但还是很说的过去的。听很多人也见很多人抱怨wb难做,甚至拿到一个漂亮结果要几个星期甚至几个月,但是本人觉得做个WB真的没有想象中那么难,本人三天就拿到了结果,当然有一点点运气的成分,比如一抗二抗的浓度一次性选择了较佳的比例,但是即使不是用的最佳比例,但只要从高开始探索还是能拿到结果的。wb最重要的就是抗体和蛋白了(抗体不灵敏,提取的蛋白含量很高也可能没有结果,而提取的蛋白中不含要检测的蛋白那么再灵敏的抗体也是无济于事),如果有一个好的抗体和没有问题的蛋白那么不出结果是很没有道理的。除了这两方面,其他做不出结果的原因可总结到一点:操作不认真,不仔细。从配胶到转膜到显影,这些都是有点机械化的过程,只要肯动动脑子,对拿到结果影响不大。

    如果认认真真的操作还没有结果,那还是考虑换抗体和蛋白吧,因为只要这两个东西是好的,不出结果真的没道理。

 



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2 刘璐 孙学军

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