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镁合金腐蚀研究进展(33)—镁合金（MAO）表面氢氧化镁涂层－EDTA的影响: rczeng 2019-2-10 22:59; 镁合金腐蚀研究进展(33)—镁合金(MAO)表面氢氧化镁涂层－EDTA的影响 EDTA-2Na分子式为C 10 H 14 N 2 Na 2 O 8 ，是六齿配体和螯合剂，具有很强地螯合如Ca 2+ 和Mg 2+ 等金属离子的能力。我们前期利用EDTA，采用水热法在AZ31以及Mg-1Li-1Ca合金表面制备 SnO 2 掺杂Ca-P涂层。处理溶液包括EDTA，Ca(NO 3 ) 2 ·4H 2 O 、NaH 2 PO 4 ·2H 2 O和 SnO 2 。研究表明，AZ31表面Ca-P-Sn涂层的化学成分主要为CaHPO 4 ·2H 2 O (DCPA)、少量SnO 2 及MgHPO 4 。该涂层具有提高耐蚀性和抗菌性的作用。这里报道的是，利用EDTA，在镁合金及其阳极氧化膜表面制备氢氧化镁涂层的结果。（一）镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层通过在LiOH溶液中添加EDTA-2Na作为 Mg 2+ 离子络合剂，采用水热法（图1）在镁合金AZ31基体上成功制备了一层纳米氢氧化镁涂层（图2）。EDTA提高了氢氧化镁膜的厚度，改变了涂层微观形貌，增加了涂层结合力以及耐蚀性等。该项工作 Corrosion resistance of nanostructured magnesium hydroxide coating on magnesium alloy AZ31- influence of EDTA 2019年2月4日（大年三十）在线发表在《Rare Metals 》，第一作者为研究生樊晓丽，通讯作者为曾荣昌教授。图1 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层制备过程图2 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层 (a) (b) LiOH 溶液、(c) (d) EDTA-LiOH 溶液图3 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层截面形貌 (a) LiOH 溶液、(b) EDTA-LiOH 溶液图4 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层 XPS图：（a）宽谱, （b）浸泡10 min, 3 h and 6 h N1s高分辨图（c）浸泡 10 min N 1s高分辨图图5 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层耐蚀性能图6 镁合金AZ31表面纳米氢氧化镁涂层成膜机理（二）镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层对于阳极氧化膜上的氢氧化镁来说，EDTA不仅有效地促进了镁合金表面MAO膜微孔的封闭，提高了其耐蚀性，而且该涂层在模拟体液中还表现出良好的类生物矿化效果，这可能是一种具有应用前景的骨植入涂层制备方法。图7 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层制备过程参考图8 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层图9 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层成膜过程： 10 s (a-c), 30 s ( d -f), 1 min (g-i), 5 min (j-l), 10 min (m-o), 20 min (p-r) and 30 min (s-u). 图10 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层 EDS成分图11 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层耐蚀性能图12 镁合金AZ31阳极氧化膜（MAO）表面纳米氢氧化镁涂层成膜机理 EDTA对成膜的影响可归因于：EDTA分子在Mg(OH)2的成核和生长中起着至关重要的作用，由于其对Mg 2+ 优异的络合能力。通常，在具有不同pH值的水溶液中，EDTA具有七种不同的形式：H 6 Y 2+ ，H 5 Y + ，H 4 Y，H 3 Y －，H 2 Y 2－，HY 3－和Y 4－。阴离子Y 4－是具有最强复杂性的配体物质。Y 4－离子浓度越大，络合物越稳定。当溶液的pH值大于10时，Y 4－的存在将占主导地位。在该实验中，溶液的pH值约为13.6。因此，EDTA可能以HY 3－和Y 4－的形式存在。EDTA与Mg 2+ 络合，主要发生在α－Mg溶解的早期阶段。因为此时Mg基底表面和溶液中具有丰富的Mg 2+ 离子。EDTA与Mg 2+ 离子络合并吸附于镁合金基体或MAO表面，形成单分子膜作为氢氧化镁涂层的内层，同时也作为氢氧化镁涂层赖以生长的位点。该项工作“ Corrosion resistance of in-situ growth of nano-sized Mg(OH) 2 on micro-arc oxidized magnesium alloy AZ31－Influence of EDTA ”于2019年1月22日在线发表在《Journal of Materials Science Technology 》，第一作者为研究生李长阳，通讯作者为曾荣昌教授。链接：镁合金腐蚀研究进展(31)-镁合金表面SnO2钙磷涂层耐蚀抗菌性能; 个人分类: 科研进展|5309 次阅读|0 个评论

TE煮沸法快速获得可扩增DNA: mashengwei 2017-12-1 09:20; 非常感谢何老师的分享。近期sci-hub.cc不能访问了，大家可以试试下面的两个网址： 1、 https://scihub22266oqcxt.onion.link 2、 https://sci-hub.bz TE 煮沸法快速获得可扩增 DNA 何华纲近日盟主推送了“史上最快核酸提取方法，30秒内完成”，这里跟大家分享一下我们实验室使用的民间版DNA提取方法，发表论文时（ Genetic,Physical and Comparative Mapping of the Powdery Mildew Resistance Gene Pm21 Originating from Dasypyrum villosum . Front. Plant Sci. 2017, doi:10.3389/fpls.2017.01914. ）也没有好好考虑命名，为了交流方便，不妨叫作“TE煮沸法”，具体如下： 1 、剪取 1 厘米左右叶片放入 1.5ml 离心管，玻璃棒手工研磨数下可至匀浆。 2 、加入 150 微升 TE （成分及浓度见原文）， 90 度煮 10 分钟，释放 DNA ，同时灭活各类核酸酶。 3 、 10000rpm 离心 1 分钟，可避免颗粒物对 PCR 的干扰，提高PCR稳定性；离心后无需倒管，直接取上清液作为 PCR 模板。 4 、 PCR扩增时，根据提取液中 EDTA 的用量及模板用量，按比例增加 Mg 离子，消除 EDTA 对 Taq 酶活性的影响。全过程花费时间：平均每个样品的处理时间差不多就是剪叶片编号所花时间。在对簇毛麦Pm21进行遗传作图时，面临了着这样一个问题：Pm21所在染色体区域存在严重的交换抑制（大约1/20染色体片段的总遗传距离仅0.3cM）。想用一个超大的群体来解决，但小作坊里人手紧缺。问过公司，报价不低，于是狠下心来自己摸索DNA提取方法。刚开始，想用一个相对简单的方法来提取质量较好的DNA，但是方法再简单，有些步骤总不能少的，要过上万单株的群体，恐怕还是要得抑郁症。痛定思痛，改变观念，放低要求，不讲质量，只要释放出“可扩增DNA”就行，这样就有了“TE煮沸法”，完成了Pm21的精细定位。文中Figure2的多重PCR就是用这个方法做出来的。 “TE煮沸法”，除了高浓度的TE，不使用其他试剂，避免了试剂因素对后续PCR的干扰，至于提取液中过多的EDTA，在PCR体系里按比例多加Mg2+就可以了。整个提取过程是一管式的，无需倒管，减少了人工出错环节。获得的DNA粗提液相当稳定，在4度放置几个月后PCR照扩不误。“TE煮沸法”也同样适合于小麦、大麦、玉米、水稻等单子叶植物和拟南芥、油菜、番茄等双子叶植物。 “TE煮沸法”操作简单、快速，但主要还是基于人工磨样，后续或可结合磨样机实现自动化操作。此外，由于DNA完整性可能比较差（直接电泳是看不出条带的），做做分子标记没什么问题，但要用来克隆基因，还需慎重。有需要的实验室可以试一试，同时也欢迎大家分享自己的学习和实验等的心得体会。想法不怕不成熟，就怕没想法。欢迎关注“ 小麦生信联盟 ”，了解小麦新进展; 个人分类: 文献推荐|9243 次阅读|0 个评论

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