关于biNGO的使用 功能:检测基因小集合相对于大集合的GO词汇富集情况。biNGO为cytoscape的一个插件。 设置几个参数(文件): (1)select a statisitc test 选择一个统计模型:超几何分布模型/二项式分布 (2)choose a significance level 选择显著水平参数 默认0.05 (3)select the categories to be visualized 选择显示目录:输出基因目录为过表达或者低表达。 (4)select reference set 选择一个集合作为参考: whole annotation as reference set以整个注释作为参考 use network as reference set以测试子集自身作为参考 选择其他 这里用于指定富集分析比较模式 (5)select ontology file 指的是GO词汇定义来源,一般来自于GO社区定义。但是由于GO社区中词汇定义可能会更新,因此会导致当前biNGO中存储的GO词汇过时。所以需要下载后另外指定。 当前已经存储了一些词汇集合,有来自酵母注释的结果(GOSlim_Yeast),植物注释结果(GOSlim_Yeast)以及全部GO_Full,以及GO中的一部分如GO_Molecular_Function等。如果选择了上述条款,那么后续“Select Namespace”就不再需要选择了。 选择“custom”进行定制,那么可以制定一个文件对GO词汇进行解释。 (6)select namespace 对应于(5)custom定制提供了GO词汇表后,需要进一步指定三类中哪一类用于分析。 (7)select organism/annotation biNGO已经存储一些模式物种的基因组层面的GO注释结果。如果测试集来自这些物种那么可以直接指定。如果不是,那么可以定制。模式物种GO注释最新结果可以来自于 http://geneontology.org/page/download-annotations,然后在此处定制即可。 如果不是模式物种,那么可以进一步自己定制,定制格式为: (species=Saccharomyces cerevisiae)(type=Biological Process)(curator=GO) '这一行必须要有!!!! 基因编号 = GO编号 gene1 = 0000004 要想把富集分析结果输出,那么需要在选中BiNGO setting对话框的最下面一行的check box for saving data 然后保存富集分析的结果到指定位置,如rlt.obo 产生文件信息如下: File created with bingo (c) on Oct 23, 2017 at 10:57:25 PM ontology: unknown curator: unknown Selected ontology file : /home/common-software/installed/Cytoscape_v3.5.1/download-by-ljd/go.obo Selected annotation file : /home/liujd/08_lncRNA/015_find_co-expression_genes_of_diff_lncRNA/BP.genome.anno.txt Discarded evidence codes : Overrepresentation Selected statistical test : Hypergeometric test Selected correction : Benjamini Hochberg False Discovery Rate (FDR) correction Selected significance level : 0.05 Testing option : Use whole annotation as reference set The selected cluster :(被评估的基因列表) No annotations were retrieved for the following entities:(被评估基因中没有注释的基因列表) GO-ID p-value corr p-value x n X N Description Genes in test set(列出GO富集结果) https://www.psb.ugent.be/cbd/papers/BiNGO/Customize.html