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STORM数据处理中漂移补偿: 热度 1 qaydm1979 2013-6-14 10:30; 实验中的漂移基本上无法避免的。事先预热仪器（特别是样品平台和压电平台），可以减少实验中的样品漂移。在 (d)STORM 实验中，如果使用非常高的激发光强，加快荧光分子进入稳暗态的速度，配以很高的采集速度（ 100Hz 以上），可以将单张图片的采集时间压缩在数分钟之内，这样实验期间的漂移就减少到无需补偿的程度。莱卡公司的 GSD 系统使用特殊的样品平台，也可以极大的减少漂移。不过对于多数的试验，在后期数据处理中进行漂移补偿都是必不可少的。最普遍的方法，是在样品中加入能够持续发光的小颗粒（一般是 100-200nm 大的金颗粒）。这些颗粒在大多数时间内会发光，从而被定位，以它们为准标，可以看出样品的漂移轨迹，并且予以补偿。对于某些没有观察到这些准标的帧，一般用内插法估计它们的位置，同时样品的漂移轨迹，一般会予以一定的平滑化，以减少补偿算法对噪音、单次分子定位误差的敏感度。这种方法也可以推广到三维条件下。另一种方法是利用图像的自相关性。对于数万帧的实验数据，虽然任何两帧之间的图像差异很大，但如果将任意数百帧的叠加起来，不难发现它们都呈现同样的结构，既样品的宏观结构。所以，使用平移窗口的方式，以每一帧为中心，若干帧为窗口大小，累计这个窗口内所有的分子信息，可以获得一系列的叠加图，这些叠加图之间的自相关性，可以提供样品漂移的参数。; 个人分类: 评论|4063 次阅读|2 个评论

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