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【组培技术】组培室污染了怎么办？: yalong 2015-1-26 15:36; 【组培技术】组培室污染了怎么办？现在许多科研单位和花木生产企业都已配置了组织培养室。组培技术已成为重要的生物技术之一。然而有的组培室组培苗的数量和质量却一直没有质的飞跃，究其原因，最主要的因素就是污染所造成的。被污染后首先是生产成本的提高；其二，对植株造成伤害；其三，增加接种源受污染的机率。亚龙组培特整理此篇内容分享给大家，希望对有这方面困惑的朋友有帮助！　　组培室常见污染源　　组织培养过程中的污染源主要有以下几种：（ 1 ）户外风大，菌类进屋机会多。有风就有沙，有沙就有尘，有尘就有菌，菌尘共存，这是菌类进屋的主要原因之一。（ 2 ）屋内太潮，菌类繁衍多。需保持室内空气干燥，如使用空调 “ 除湿 ” 功能，也可减少真菌生长繁殖。（ 3 ）人员带菌多。在整个操作室内，人员可说是最大的带菌者，不管在毛发或是衣服等地方，都隐藏着数不清的菌类。在进入操作室前，最好能对作业人员进行清洁处理，比如换上干净的白大褂，换上实验室的鞋，衣服鞋每星期洗一次，上超净台前手要用肥皂清洗两遍，接种前手再用酒精擦拭一遍。（ 4 ）屋内不干净。紫外线能杀灭或抑制真菌生长，因此应在每次接种前进行 20 分钟的紫外灯消毒。（ 5 ）清理屋内带菌组培苗。在植物病害中，真菌所引起的病害尤其严重，且因会产生孢子，随着空气飘散。一旦落入适当的环境下，一粒小小的孢子便会扩大成一个菌落，污染整个组织培养瓶。因此一旦有真菌污染的组培苗，就要用高压灭菌器彻底消灭，以防扩散。（ 6 ）接种不正确。不正确操作也会增加污染机率，如开盖太快，灭菌不够，操作过慢等。接种过程应该轻开盖，快操作。组培室污染原因　　若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染，比如培养基灭菌不彻底；超净工作台长时间不换滤网，致使净化能力降低；接种用具灭菌不彻底；操作不正确，动作生硬缓慢，开瓶时间太久，接种台摆放物品杂乱，操作中心在人体范围之内；接种室长期不灭菌，菌类太多等。　　若污染菌类是从材料周围长起，则可证明是植物材料带菌引起。可能是接种用具灭菌不彻底，接种时材料被污染；或者是未及时发现污染苗，接种过程交叉感染等。　　若菌类从材料培养基以上部分长起，而不是从培养基先长起，且发生在 5 天以后，则说明是材料带的内生菌。若从培养基以下开始长菌，发生时间较早，且有从里向外的趋势，则说明是切口引起的污染，原因可能是灭完菌后，未剪去两个切口或虽剪但器具带菌。污染苗如何抢救？　　真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉，即使仅形成菌丝也应处理后扔掉，因为菌丝能够达到材料内部，因此，真菌污染是灭绝性的。细菌污染后，由于细菌繁殖是靠芽孢，细菌不会弥散在整个空间，因此只要及时发现，可将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可以用。济南亚龙生物科技有限公司愿给全中国的组培育苗企业提供无偿的免费技术咨询，再次感谢大家对本篇组培室污染怎么办？希望下面的文章对你帮助更大！亚龙组培系统; 个人分类: 组培技术|4764 次阅读|0 个评论

【组培设备】组培室仪器设备配置: yalong 2014-12-29 11:00; 组培室仪器设备配置在植物组织培养过程中，根据所培养的植物种类、生产规模，选择合适的器材、设施是十分必要的，只有这样才能确保整个操作过程的顺利进行。在器材、设施的选择上，不要贪大求洋，应该在其是否实用上多下功夫。在研究型的组织培养操作中，往往对器材、设施的要求较高；而在生产型的组织培养中，则对器材、设施的要求却较为粗放，因此管理者必须根据实际情况来进行培养器材、设施的遴选。亚龙组培 - 中国植物组织培养系统建设第一品牌在植物组织培养的过程中，从外植体的采收到试管苗的定植都必须要在特定的环境中进行，例如，培养基的配制要在专用的器材、设施中进行；外植体的接种要在专用的器材、设施中进行。应该根据植物组织培养不同阶段的需要，选择不同的器材、设施。只有从降低投入、提高工效、节约劳力等诸方面加以考虑，才能降低培养成本、提高培养效率。在植物组织培养过程中，所使用的器材种类较多，但它们通常可以分为通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。在使用这些容器、设备时，必须要了解它们的基本用途，并学会它们的基本用法。例如，不能给容量瓶加热；必须用磨砂玻璃灯罩来熄灭正在燃烧的酒精灯；应该定期更换超净工作室的无菌滤膜等等。详细操作可参考具体设备、容器的使用说明。组培设备（ 1 ）通用器械 ①烧杯：用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有 50ml 、 100ml 、 250ml 、 500ml 、 1000ml 。 ②烘箱：用来烘干器械。 ③恒温水浴：用来溶解琼脂等物质。 ④玻璃搅拌棒：用来配制培养基。 ⑤洗耳球：用来辅助吸取、转移少量液体。 ⑥冰箱：用来贮存化学药剂、植物材料等。 ⑦牛角勺：用来转移化学药剂。 ⑧玻璃漏斗：用来过滤溶液。 ⑨剪刀：用来修剪外植体或剪切嫩茎。 ⑩器械架：在无菌操作期间用来放置灭菌的器械。（ 2 ）各种盛具 ①搪瓷浅盘：用来承载各种器械容器。 ②塑料盆：用于清洗培养容器。 ③铁丝筐：用来盛放灭菌容器等物品。 ④纯水水桶：用来存放去离子水或蒸馏水。常用的规格有 10L 、 20L 。 ⑤塑料桶：用来存放洗涤溶液、废弃溶液。 ⑥各种规格的磨砂玻璃瓶：用来盛放培养母液，以及各种植物生长物质。（ 3 ）计量器械亚龙组培-中国植物组织培养系统建设第一品牌 ①量筒：用来量取一定体积的液体。常用的规格有 25ml 、 50ml 、 100ml 、 500ml 、 1000ml 。 ②容量瓶：用来配制标准溶液。常用的规格有 50ml 、 100ml 、 500ml 、 1000ml 。 ③大肚移液管：用来吸取定量溶液。常用的规格有 1ml 、 5ml 、 10ml 。 ④刻度移液管：用来吸取定量植物生长物质溶液。常用的规格有 1ml 、 5ml 、 10ml 。 ⑤移液管架：用来放置、固定移液管。 ⑥酸度计：用来检测培养基的 pH 。 ⑦药物天平：用来称取配制培养基的药品。 ⑧分析天平：用来称取少量有化学试剂，进行化学分析。（ 4 ）灭菌器械组培设备 ①磨砂口玻璃瓶：用来对植物材料进行表面灭菌。 ②酒精灯：用来进行接种器材的表面灭菌。 ③细菌过滤器：用来过滤不能进行高温灭菌的试剂溶液。 ④无菌滤纸：用来汲取器材、植物材料表面的水分。 ⑤无菌脱脂棉：用来进行器械、植物材料表面的灭菌处理。 ⑥真空泵：用来吸滤灭菌。 ⑦高压灭菌锅：对培养基、接种器材进行灭菌处理。 ⑧可调试电炉：用来加热高压灭菌锅。 ⑨皮下注射器：用来对溶液进行过滤、除菌。 ⑩紫外线灭菌灯：用来对接种室、培养室、操作室等工作环境进行灭菌处理。（ 5 ）接种器械 ①超净工作台：用来过滤通过接种工作台面的空气，以便进行无菌操作。 ②小型喷雾器：装载灭菌药液，来给超净工作台等处喷雾灭菌。 ③钝头镊子：在接种操作、继代培养时移取植物材料。 ④尖头镊子：用来分离植物材料。 ⑤解剖刀：用来切割植物材料。 ⑥打孔器：用来切取大小一致的圆柱形植物材料。 ⑦双目显微镜：在解剖较小的外植体时，用来观测材料。 ⑧细菌滤膜：用来进行溶液的常温除菌。 ⑨接种针：用来转移细胞团、愈伤组织。（ 6 ）培养器械 ①试管：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有 50px × 375px 、 75px × 375px 。 ②培养皿：用来作为外植体的培养容器。常用的规格有直径 225px 、 300px 。 ③锥形瓶：即三角烧瓶，主要作为培养器材，常用的规格有 50ml 、 100ml 。 ④显微镜：用来观察植物材料。 ⑤成套载玻片：用来制作植物材料显微制片。 ⑥铝箔：用于培养容器封口。 ⑦橡皮筋：用来束紧培养容器的封口材料。 ⑧血球计数器：用来进行植物细胞计数。 ⑨空调：用来调节操作间、培养室的温度。 ⑩摇床：用来进行细胞悬浮培养。更多详情可以咨询济南亚龙组培; 个人分类: 组培设备|2665 次阅读|0 个评论

【组培设备】植物组织培养必须的两个条件: yalong 2014-12-24 11:19; 【组培设备】植物组织培养必须的两个条件一.实验室（济南亚龙生物科技有限公司）在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。（1）实验室设计原则：保证无菌操作，达到工作方便，防止污染。 (2) 实验室组成：化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室（接种室）、培养室、细胞学实验室。化学实验室（准备室）：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器.洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。无菌室的建造要求严格，接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求接种室干爽安静，清洁明亮，除出入口和通气口外，应当密闭，配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动，用紫外光灯灭菌后，能较长时间保持无菌状态。为避免消毒药品的腐蚀，地板、内墙和作业台应采用耐水、耐药的材料，如经过油漆，铺上瓷砖或玻璃，或采用磨光水泥等，通气口要安装排风扇，定期开机更换空气。无菌室设内外二间，外间小些，为缓冲室，供工作人员换衣、帽、鞋、口罩之用。备有衣帽钩和拖鞋架。内间较大，接种用，备有工作台，放物台，小型离心机，真空抽气机等。内外间分别安装紫外灯，操作前至少开灯20分钟。室内定期用甲醛和高锰酸钾熏蒸。（3）主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。培养室：培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。室内要求内壁保温和油漆，具有磨光水泥的或油漆过的地板，顶高以2.6m为宜，易于控制温湿度，窗户上要装双层密封玻璃窗。有窗户虽对保温保湿不利，但有自然光射入，对苗的生长和无菌有好处。室内要有足够的电源。室内要保持清洁，定期用20%新洁尔灭消毒，防止杂菌生长。（4）由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养室。培养架可分4－5层，上面安装30－40Ｗ日光灯照明，每天照明10－16小时左右，用自动定时器控制。温度最好保持在25－28℃左右。室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在40%～60%为好，可安装加湿器。现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长良好，驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。（5）设备主要应有：空调机，供升降温用；加热器，供加热用；温度控制器，供恒温用；定时器，供控制光照时间用；培养架，供放置培养瓶用，培养架的框子用木制或三角铁制皆可，应漆成白色或银灰色，每层隔板可用玻璃或木料制成，但光照效果要好；日光灯供光照之用。亚龙组培-中国植物组织培养系统建设第一品牌二.常用药品组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类：（1）消毒药品主要有次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、溴水、硝酸银等。（2）无机盐类(inorganic element)包括大量元素和微量元素两类，主要的盐类有KNO3、MgSO4·7H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl2·2H2O、Fe2（SO4）3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO4·4H2O、MnCl2·2H20、KI、H3BO3等，无机盐是供外植体吸收的基本营养成分，各有不同作用，如N、P影响蛋白质的合成，Ca、K、S、Mg影响酶活性等。（3）有机化合物(organic compound) 主要有蔗糖、维生素类(vitamin)肌醇（myo—inosltol）、氨基酸（almino acide）等。其中蔗糖是不可缺少的碳源，也是渗透压调节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分，也是有机氮源。（4）植物生长调节剂（hormone）用于组织培养的主要有生长素、细胞分裂素及赤霉素三大类： ⒈生长素类(auxin) 主要有吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4－D和吲哚丁酸（IBA）。2，4－D有利愈伤组织生长，NAA、IAA、IBA有利于器官分化。 ⒉细胞分裂素类（cytokinin）主要有激动素（KT）、6－苄基腺嘌呤（BA）、玉米素（ZT）等。其作用是促进细胞分裂与分化，其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形成。 ⒊赤霉素（gibberellic acid）以GA3运用最广泛，有促进不定芽和幼株长的作用。（5）有机附加物包括人工合成和天然的有机物，常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂，是外植体的支持体，常用浓度为0.5－1％。（6）水培养基用水原则上使用蒸馏水，去离子水等，尤其在对化学成分要求较精确的试验中。组培设备供应，组培技术培训济南亚龙组培; 个人分类: 组培设备|6862 次阅读|0 个评论

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