Visualized Multigene Editing System for Aspergillus niger

黑曲霉的可视化多基因编辑系统

来源：ACS SYNTHETIC BIOLOGY

IF：4.7

摘要：抗性标记可以确保CRISPR / Cas9系统进入黑曲霉细胞。为了提高最初转化板上阳性菌落筛选的效率，研究通过独特的tRNA引导RNA（gRNA）阵列设计了一个可视化的多基因编辑系统（VMS），其中包含色素基因albA和靶基因的gRNA。albA的破坏产生白色菌落，内源性tRNA（Ala），tRNA（Phe），tRNA（Arg），tRNA（Ile）和tRNA（Leu）的序列增强gRNA的释放。以ammA、amyA、prtT、kusA和glaA为报告基因，分析了尼日尔曲霉菌株AG11中多基因的破坏效率。在初级转化板上的白色菌落中，单靶、二靶、三靶、四靶和五靶基因的破坏率分别达到89.2%、70.91%、50%、22.41%和4.17%。本文开发的VMS为筛选黑曲霉同核多基因编辑菌株提供了一种有效的方法。