今天把QIAGEN RNeasy mini kit 的handbook又翻出来看了一遍。
今天,总算是把其原理了解了一些。
1、在超净台将细胞分装到1.5mlEP管,洗一遍,冻起来
2、离心,加入裂解缓冲液 RLT
3、涡旋震荡(算是匀浆了)
4、将裂解液加入粉红色的柱子,离心,去过滤液(RNA已经结合到柱子的硅胶膜上,而DNA、蛋白什么的大部分都到过滤液里去了)
5、Buffer RW1洗(洗膜上的DNA、蛋白),离心,弃过滤液
6、Buffer RPE 洗第一遍(洗膜上得盐,说是上一步残留的盐),离心,弃过滤液(wash)【乙醇沉淀,洗盐】
7、Buffer RPE 洗第二遍,离心弃过滤液(wash)【乙醇沉淀,洗盐】
8、RNase-Free water 洗脱(elute)
9、RNA-80°c保存
1、硅胶膜捕获核酸的原理是什么?
利用核酸在裂解液下与硅胶膜特异结合,在洗脱液条件下被洗脱的原理。
https://m.sciencenet.cn/blog-201685-600989.html
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