近日，天津大学蒋建兰课题组在Synthetic and Systems Biotechnology杂志发表文章Synthesis and assembly of full-length cyanophage A-4L genome。天津大学化工学院硕士研究生张婷和许博楠为文章共同第一作者。

图1. 噬藻体A-4L基因组中的部分预测启动子和毒性基因

从头合成通常由寡核苷酸开始，逐步组装大的DNA片段直至全长基因组。考虑到基因表达产物可能对宿主产生毒性，研究者们提出了一种克隆策略。将噬藻体基因组进行合理拆分，每个ORF均分割为缺失其启动子及起始密码子的片段，从而规避了毒性基因表达造成的克隆失败。获得了所有ORF的短片段后，通过DNA组装技术最终在酵母中成功构建了人工噬藻体A-4L的全长基因组（Syn-A-4L）。与天然噬藻体相比，Syn-A-4L被设计为环形质粒，并只保留了一段末端重复序列。

图2. 克隆策略

Synthesis and assembly of full-length cyanophage A-4L genome

Ting Zhang, Bonan Xu, Jia Feng, Pingbo Ge, Guorui Li, Jiabao Zhang, Jianting Zhou, Jianlan Jiang

https://doi.org/10.1016/j.synbio.2022.12.004