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Visualized Multigene Editing System for Aspergillus niger
黑曲霉的可视化多基因编辑系统
来源:ACS SYNTHETIC BIOLOGY
IF:4.7
摘要:抗性标记可以确保CRISPR / Cas9系统进入黑曲霉细胞。为了提高最初转化板上阳性菌落筛选的效率,研究通过独特的tRNA引导RNA(gRNA)阵列设计了一个可视化的多基因编辑系统(VMS),其中包含色素基因albA和靶基因的gRNA。albA的破坏产生白色菌落,内源性tRNA(Ala),tRNA(Phe),tRNA(Arg),tRNA(Ile)和tRNA(Leu)的序列增强gRNA的释放。以ammA、amyA、prtT、kusA和glaA为报告基因,分析了尼日尔曲霉菌株AG11中多基因的破坏效率。在初级转化板上的白色菌落中,单靶、二靶、三靶、四靶和五靶基因的破坏率分别达到89.2%、70.91%、50%、22.41%和4.17%。本文开发的VMS为筛选黑曲霉同核多基因编辑菌株提供了一种有效的方法。
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GMT+8, 2024-5-20 22:31
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